Diversidade genética por marcador RAPD em populações naturais de Piptocarpha angustifolia Dusén ex Malme

Abstract

Os projetos com espécies nativas dependem da disponibilidade de sementes e mudas nas quantidades requeridas e com a qualidade apropriada. O mercado contudo, não oferece sementes de inúmeras espécies, e para muitas inexistem estudos visando conhecer a estrutura genética das populações naturais, informação indispensável para formação de lotes de sementes com qualidade genética, entre as quais o vassourão-branco (Piptocarpha angustifolia Dúsen ex Malme). O vassourão-branco é comum nas clareiras, capoeirões e no estrato secundário da floresta com Araucária. Além das aptidões madeireiras e para recuperação ambiental, apresenta potencial para compor sistemas silvipastoris. Os objetivos deste trabalho foram: adaptar protocolo para a extração de DNA genômico; quantificar a variabilidade genética intra e inter populacional e estabelecer critérios para a seleção das árvores-matrizes, com base na genotipagem, para coleta de sementes em populações naturais de vassourão- branco. As árvores amostradas de vassourão-branco, das quais foram coletadas folhas para extração do DNA genômico, estão localizadas em fragmentos florestais em Curitiba e São José dos Pinhais (PR) e Rio Negrinho (SC). Para extração do DNA genômico foram utilizadas duas folhas com tecido jovem, pesando aproximadamente dois gramas, que foram maceradas em almofariz após adição de nitrogênio líquido. A extração do DNA genômico das folhas do vassourão-branco, foi eficiente com qualidade e nas quantidades requeridas para execução da metodologia da PCR-RAPD. As dissimilaridades genéticas entre as populações de Rio Negrinho (SC) e Curitiba (PR) e entre São José dos Pinhais (PR) e Rio Negrinho (SC) foi moderada, contudo entre Curitiba e São José dos Pinhais (PR) foi grande. A correlação entre a distância geográfica e dissimilaridade genética entre as populações foi baixa. A maior parte da variabilidade genética encontra-se dentro das populações que apresentam-se estruturadas. A seleção dos indivíduos para coleta de sementes deve pressupor a obtenção da maior dissimilaridade possível, objetivando maior variabilidade genética no lote de sementes. As árvores mais dissimilares geneticamente dos agrupamentos devem ser consideradas, pela contribuição para obtenção da maior variabilidade genética do lote de sementes.

Projects of forestation and reforestation with native species depend on the availability of seeds and seedlings in large quantities and of good quality. But in most cases there are no seeds readily available or studies that show the population genetic structure, among them Piptocarpha angustifolia what would greatly improve seed collection as genetic quality of a seed lots. The objectives of this work were adapting a protocol for the extraction of genomic DNA, quantify the genetic variability intra and inter population and establish criteria based on genotypes detected by RAPD markers to collection of seeds. The Piptocarpha angustifolia is a species from secondary Araucaria forests, with high potential of use in environmental restauration programs, wood production and agroforestry systems. The trees sampled from vassourão-branco, of which were collected leaves for extraction of DNA, are located in forest fragments in Curitiba and São José dos Pinhais (PR) and Rio Negrinho (SC). For extraction of DNA were used two leaves weighing about two grams, which were macerated in mortar after addition of liquid nitrogen . The extraction of genomic DNA from the leaves of Piptocarpha angustifolia was efficient with quantity and quality for implementation of RAPD-PCR metodology. The genetic dissimilarity between the populations of Rio Negrinho (SC) and Curitiba (PR) and between São José dos Pinhais (PR) and Rio Negrinho (SC) was moderate. The genetic dissimilarity between Curitiba and São José dos Pinhais (PR) was high. The correlation between the geographical distance and genetic dissimilarity between populations was low. The most genetic variability was found within populations of Piptocarpha angustifolia. The populations are structured. The selection of the trees-plus must assume the achievement of greater dissimilarity, targeting high genetic variability on seed lot. The more genetic dissimilar trees-plus of relative groups should be considered because it is important to obtain seeds with greater genetic variability in seed lot.