Caracterização de calos embriogênicos de Murici-Pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss.)

Abstract

O murici-pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss.) é uma planta medicinal do Cerrado, utilizada principalmente como febrífugo e adstringente nas diarréias e disenterias, que apresenta dificuldades de propagação sexuada. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar calos embriogênicos obtidos a partir de segmentos foliares inoculados em meio de cultura MS suplementado de 1,0 mg L -1 de 2,4-D. Após sessenta dias, com a formação dos calos, estes foram repicados, por três vezes. A cada subcultivo, avaliou-se a formação de embriões globulares. Amostras de calos do cultivo inicial e dos subcultivos foram utilizadas para as análises de microscopia eletrônica de varredura e transmissão, avaliação dos teores de amido e fenóis totais, além da determinação do índice mitótico e da viabilidade celular. O terceiro subcultivo apresentou a maior porcentagem de embriões somáticos, aproximadamente 70%. As células progrediram de um formato alongado para o isodiamétrico, caracterizando células meristemáticas com capacidade embriogênica. Células de calos obtidos do terceiro subcultivo apresentam organelas celulares mais desenvolvidas, apresentando evidências subcelulares de competência embriogênica. Calos subcultivados apresentaram o maior teor de amido aos 60 dias de incubação e a maior porcentagem de fenóis totais aos 80 e 100 dias. No segundo subcultivo, aos 40 dias de incubação, ocorre maior índice de divisão celular (18%) e aos 50 dias ocorre maior porcentagem de células viáveis (83%) com características embriogênicas.

The Byrsonima intermedia A. Juss. is a medicinal plant from Cerrado, used mainly as febrifuge and astringent in diarrheas and dysentery, and present difficulties in relation to its sexual propagation. This objective of this work was to characterize the embryogenic callus obtained from leaf segments inoculated in MS culture medium supplemented with 1.0 mg L -1 2,4-D. After sixty days, the formed callus was replicated three times. For each sub cultivation, the number of globular embryos formed was evaluated. Samples of initial callus and those obtained from the sub cultivations were used for scanning electronic microscopy, starch and total phenols quantification, in addition to the determination of mitotic index and cell viability. The third sub cultivation showed the highest percentage of somatic embryos, approximately 70%. The cells changed the shape from elongated to isodiametric, characterizing meristematic cells with embryogenic capacity. Cells of the callus obtained in the third sub cultivation showed cellular organelles more developed, evidencing the embryogenic competence at cellular level. Callus sub cultivated showed a higher starch level at 60 days after incubation and the highest total phenolic concentration at 80 and 100 days cultivation. In the second sub cultivation, at 40 days of incubation, it was observed the highest cellular division index (18%) and at 50 days it was verified the highest percentage of viable cells (83%) with embryogenic characteristics.